V lidovém léčitelství se využívala při průjmu, zánětech žaludeční sliznice a při tyfu a úplavici. Ze šťávy a kořenů se získává červené barvivo, které slouží pro barvení vlny a látek. Dříve se tato rostlina také využívala v koželužnách.

Třezalka tečkovaná se dříve využívala také jako barvířská rostlina, k barvení vlny a látek. Získávala se z ní oranžová a žlutá barva.